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近日，中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所研究員趙群和研究員張麗華等與中國科學(xué)院精密測量科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新研究院副研究員龔洲合作，提出了利用原位化學(xué)交聯(lián)—質(zhì)譜技術(shù)，解碼細(xì)胞中蛋白質(zhì)動態(tài)結(jié)構(gòu)的策略。

該策略將AlphaFold2的結(jié)構(gòu)作為先驗信息，結(jié)合in vivo XL-MS數(shù)據(jù)與多種結(jié)構(gòu)計算方法評估結(jié)構(gòu)與交聯(lián)信息的匹配度，重構(gòu)了細(xì)胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)，尤其是多結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)和固有無序蛋白質(zhì)（IDP）的原位動態(tài)結(jié)構(gòu)，為深入研究蛋白質(zhì)在細(xì)胞微環(huán)境中發(fā)揮功能的分子機制提供技術(shù)支撐。相關(guān)成果發(fā)表在《德國應(yīng)用化學(xué)》上。

活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的原位動態(tài)結(jié)構(gòu)對于揭示其生物學(xué)功能至關(guān)重要。隨著深度學(xué)習(xí)算法助力蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測的發(fā)展迭代，AlphaFold2實現(xiàn)了對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的全面預(yù)測，然而該方法對柔性區(qū)域的結(jié)構(gòu)預(yù)測仍面臨挑戰(zhàn)。近年來，in vivo XL-MS以高通量、高靈敏，且對蛋白質(zhì)純度要求低等優(yōu)勢，在解析活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的原位動態(tài)結(jié)構(gòu)方面展示出重要潛力。

本工作中，針對多結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)，研究團(tuán)隊提出了將結(jié)構(gòu)域作為整體，利用結(jié)構(gòu)域間的XL-MS數(shù)據(jù)對細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)動態(tài)結(jié)構(gòu)建模，實現(xiàn)了三種多結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)——鈣調(diào)蛋白、hnRNP A1和hnRNP D0在細(xì)胞內(nèi)的動態(tài)結(jié)構(gòu)表征。此外，針對IDP，研究團(tuán)隊提出了兩種互補的結(jié)構(gòu)表征策略：一是將XL-MS信息直接轉(zhuǎn)換為距離約束用于IDP的結(jié)構(gòu)計算，二是首先使用全原子分子動力學(xué)模擬進(jìn)行無偏采樣，然后基于XL-MS數(shù)據(jù)對采樣結(jié)構(gòu)進(jìn)行評估和篩選。利用這兩種策略，研究團(tuán)隊解碼了高遷移率組蛋白HMG-I/Y和HMG-17在細(xì)胞內(nèi)的動態(tài)系綜構(gòu)象。

相關(guān)論文信息：https://doi.org/10.1002/anie.202301345 

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